Предположение о наличии первичной или вторичной иммунологической недостаточности. Показанием для иммунологического обследования в данном случае будет служить наличие затяжного, рецидивирующего течения хронической бактериальной или вирусной инфекции кожи, ЛОР-органов, дыхательных путей, отсутствие эффекта от обычной терапии или недостаточная ее эффективность, присоединение аллергических, аутоиммунных и других расстройств.

Случаи явных иммунологических заболеваний. Иммунный статус оценивают с целью получения дополнительной диагностической информации, например обнаружение антител к ДНК при СКВ, ревматоидного фактора при ревматоидном артрите, антител к инсулину при сахарном диабете I типа.

Трансплантация органов и тканей.

Контроль за проводимой иммуномодулирующей терапией.

Методы, обеспечивающие количественную и функциональную оценку иммунной системы, используемые в клинической практике, разработаны достаточно полно. Однако трактовка результатов комплексного иммунологического обследования, позволяющая дать конкретное заключение об иммунном статусе больного, о степени иммунологических нарушений, об их связи с клиническими проявлениями болезни, о необходимости медикаментозного воздействия, часто вызывает затруднения.

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ИММУННОГО СТАТУСА. Количественная оценка содержания IgA, IgM, IgG в сыворотке крови (метод радиальной иммунодиффузии в агаровом геле по Манчини) необходима для диагностики первичной и вторичной иммунологической болезни, а также для контроля за проводимой иммуномодулирующей терапией.

Возможные результаты и их трактовка. Первичные иммунодефициты проявляются снижением концентрации всех иммуноглобулинов (врожденная агамма- гипогаммаглобулинемия) или уровня IgA и IgG при нормальном или повышенном уровне IgM (врожденная гипогаммаглобулинемия) или снижением уровня IgA (селективная недостаточность).

Повышение уровня всех иммуноглобулинов – гипергаммаглобулинемия – является признаком хронических инфекционных процессов, системных заболеваний соединительной ткани, хронических заболеваний печени и др.

Селективный подъем IgA или IgG может быть признаком миеломной болезни. Селективный подъем IgA встречается при болезни Берже. Изолированный подъем концентрации IgM может быть признаком макроглобулинемии.

Электрофоретический анализ иммуноглобулинов сыворотки крови и мочи. Применяется при подозрении на миеломную болезнь, макроглобулинемию Вальденстрема, болезнь тяжелых цепей, амилоидоз. Этот анализ необходим при криоглобулинемии, положительной реакции Бенс-Джонса, повышении вязкости крови и некоторых лимфопролиферативных заболеваниях.

Возможные результаты и их трактовка. Увеличение фракции сывороточных иммуноглобулинов – гипергаммаглобулинемия – не имеет определенного диагностического значения, встречается при многих заболеваниях.

Сывороточный пик IgG или IgA и мочевой пик белка Бенс-Джонса – признаки миеломной болезни.

Мочевой пик белка Бенс-Джонса без увеличения сывороточных IgA и IgG – признак миеломной болезни.

Сывороточный пик IgM – проявление макроглобулинемии.

Сывороточный и мочевой пик IgG – признак болезни тяжелых цепей.

Определение иммунных комплексов в биологических жидкостях. Четких клинических показаний к проведению данного исследования нет.

Возможные результаты и их трактовка. Наличие иммунных комплексов в сыворотке крови не является признаком иммунокомплексного заболевания. Известны случаи, когда повреждение тканей, вызванное иммунными комплексами, развивается, но попытки обнаружить их в крови безрезультатны и, наоборот, присутствие иммунных комплексов в сыворотке крови может не сопровождаться повреждением ткани.

Определение уровня циркулирующих иммунных комплексов может быть полезным для оценки активности таких заболеваний, как СКВ, ревматоидный артрит, при контроле за эффективностью обменных переливаний плазмы и для прогноза течения опухолевых процессов.

Определение аутоантител методом непрямой иммунофлюоресценции является дополнительным диагностическим тестом при заболеваниях с иммунным патогенезом.

Возможные результаты и их трактовка. Выявление антител к ДНК – диагностический критерий СКВ, смешанного соединительнотканного заболевания (синдром Шарпа), хронического активного гепатита, некоторых вариантов ревматоидного артрита.

Антитела к РНК – диагностический критерий смешанного соединительного заболевания (синдром Шарпа).

Антимитохондриальные антитела – признак первичного билиарного цирроза.

Тироидные антитела – признак аутоиммунного тироидита Хашимото и микседемы взрослых.

Антитела к собственным IgG – ревматоидные факторы, определяются при ревматоидном артрите, инфекционном эндокардите и других заболеваниях.

Антитела к инсулину – признак сахарного диабета I типа.

Оценка системы комплемента. Исследование общей гемолитической активности комплемента (СН50) и его различных фракций.

Показанием к данному исследованию служит подозрение на генетические дефекты.

Возможные результаты и их трактовка. Снижение уровня СН50-комплемента может быть признаком иммунокомплексного заболевания, например СКВ, или отражать наследственный дефект. В случае возможного наследственного дефекта необходимо исследование всех компонентов комплемента.

Определение количества Т- и В-лимфоцитов в периферической крови. Необходимо для диагностики и наблюдения за течением первичной или вторичной иммунологической недостаточности, для классификации лимфопролиферативных заболеваний.

Методы выявления и характеристики Т-лимфоцитов. Определение абсолютного и относительного количества Т-лимфоцитов периферической крови необходимо для последующего изучения популяций Т-лимфоцитов, основанного на выявлении поверхностных маркеров различных типов Т-лимфоцитов. Маркерами служат специфические антигены лимфоцитов и их рецепторы. Т-лимфоциты имеют антигены, отличающиеся от антигенов других лимфоцитов. С помощью специфических сывороток, полученных против этих антигенов, определяют Т-лимфоциты (цитотоксическая реакция, реакция иммунофлюоресценции, непрямой метод выявления антигенов Т-лимфоцитов с использованием белка А стафилокока). Рецепторы Т-лимфоцитов связывают некоторые эритроциты, в результате чего с ними образуются розетки (лимфоцит, присоединивший несколько эритроцитов), которые визуализируют данный тип клеток. К таким методам относятся определение общих Т-лимфоцитов в тесте с эритроцитами барана.

(Е-РОК – розеткообразующая клетка), активных Т-лимфоцитов ЕА-РОК и Т-лимфоцитов, образующих розетки с аллогенными и аутологичными эритроцитами.

Популяция Т-лимфоцитов гетерогенна и состоит из субпопуляций, осуществляющих различные функции. Т-супрессоры характеризуются наличием рецепторов для Fc-фрагмента IgG, а Т-хелперы – наличием рецептора для IgM.

Возможные результаты и их трактовка. В норме число Т-лимфоцитов составляет 70- 80% общего числа лимфоцитов периферической крови.

Диагностическое значение имеет значительное снижение числа Т-лимфоцитов при первичных иммунодефицитах. Умеренное снижение числа Т-лимфоцитов может наблюдаться при СКВ, хроническом активном гепатите и других заболеваниях.

Изменение соотношения регуляторных клеток трудно для интерпретации и диагностического значения обычно не имеет.

Методы выявления и характеристики В-лимфоцитов основаны на определении специфических антигенов В-лимфоцитов и их рецепторов. Использование специфических антител для выявления В-лимфоцитов объясняется тем, что последние несут на своей поверхности иммуноглобулиновые рецепторы. В связи с этим применяются специфические антитела против иммуноглобулинов и антисыворотки против антигенов. Известны следующие реакции выявления В-лимфоцитов: цитотоксическая с антисывороткой против антигенов, с помощью антиглобулиновой сыворотки; иммунофлюоресценция с мечеными антисыворотками; непрямой метод обнаружения иммуноглобулиновых рецепторов с использованием стафилококков, содержащих белок А; определение В-лимфоцитов с помощью эритроцитов (розеткообразование) и других частиц, покрытых иммуноглобулинами; метод с использованием антител против определенных классов иммуноглобулинов; смешанный антиглобулиновый тест; образование розеток с микробами, покрытыми иммуноглобулинами. В связи с тем, что В-лимфоциты имеют на своей поверхности рецепторы для компонентов системы комплемента, их можно определить, используя эритроциты или частицы, покрытые компонентами комплемента (ЕАС-РОК). В-лимфоциты можно выявить с помощью эритроцитов мыши, с которыми они образуют розетки (М-РОК).

Возможные результаты и их трактовка. В норме число В-лимфоцитов в периферической крови составляет 15-20%.

Диагностическое значение имеет значительное снижение числа В-лимфоцитов, которое наблюдается при первичных иммунодефицитах. Повышение числа В-лимфоцитов диагностического значения не имеет.

Реакция бласттрансформации на неспецифические митогены. Необходима для функциональной оценки Т- и В-лимфоцитов, а также для контроля за использованием иммуномодуляторов.

Наиболее распространенный тест – изучение пролиферативного ответа Т-лимфоцитов на неспецифические митогены – фитогемагглютинин (ФГА) и конканавалин А (КонА). Реакцию следует проводить в динамике, желательно с различными дозами митогена. Показатели единичного наблюдения, даже если они далеко выходят за пределы нормы, имеют малую диагностическую ценность и не обязательно свидетельствуют о нарушении клеточно-опосредованного иммунитета.

Для функциональной оценки Т-хелперов используется исследование синтеза иммуноглобулинов В-лимфоцитами, стимулированными поликлональным В-клеточным активатором – митогеном лаконоса. Стимуляция синтеза иммуноглобулинов происходит только при взаимодействии Т-хелперов с В-лимфоцитами.

Возможные результаты и их трактовка. Как правило, наблюдается параллелизм между числом Т-лимфоцитов и реакцией бласттрансформации, чем меньше число Т-лимфоцитов, тем менее выражена данная реакция. Однако имеются исключения, например при синдроме Луи-Бар количество Т-лимфоцитов нормально, а реакция бласттрансформации резко угнетена.

Оценка фагоцитарной системы. Проводится при подозрении на первичный иммунодефицит различными методами: определение фагоцитарного числа – количества лейкоцитов крови, способных фагоцитировать микробы, фагоцитарного индекса – поглотительной способности фагоцитов, микробоцидной способности фагоцитирующих клеток.

Возможные результаты и их трактовка. Снижение изучаемых показателей может быть признаком иммунодефицита. Однако дефекты фагоцитарного звена, как правило, в изолированном виде не встречаются.